百度作业网为什么pcr要设置正反引物
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/06/16 19:18:04
同楼上,当初我问老师这个问题时,他说大学才学这么深
因为RT-PCR的模版是单链的RNA,一种引物就够了,而常规PCR的引物是双链DNA,需要上下游引物从两端同时扩增.
因为DNA聚合时需要3‘OH,这个只能由引物提供（没原因,就因为是那样）.这个引物是一小段RNA,引物绝对是RNA,而不是DNA.看看DNA复制需要什么酶就知道了,需要依赖DNA的RNA聚合酶（DDR
因为GC之间有三个氢键,而AT之间只有两个氢键,因此GC含量越高,要打开氢键的能量就要求越大,即退火温度越高.PCR退火有的是根据GC含量估算Tm更详细说明次料：PCR引物应该保持合理的GC含量.含有
你理解的没错.上下游引物同时用才能特异性扩增中间的那部分片段.
在聚合作用的起始时,可以刺激合成另一种大分子,并与反应物以共价键形式连接的序列.在核酸化学中,引物是一段短的单链RNA或DNA片段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,
用PP5.0或oligo软件.网上有很多说明书的,操作十分简单再问：等于白说
关键就是这个引物的设计,如果你能设计好并且成功RT-PCR,那就没问题了.
体内DNA复制也是有引物的,你好好再看看课本吧.引物在PCR以及DNA复制中的作用就是起到引导DNA聚合酶结合和开始聚合反应的过程.
楼主说的是扩增子,即两引物目标位点之间的序列长度.PCR过程中,扩增就跟修路一样,越长越费工.在能够保证特异性的情况下,当然是越短越有效率,100-200bp就是综合两方面的考虑而建议的最佳扩增子长度
解题思路：在PCR技术中双链DNA分子中每条链都要和引物结合，进行复制。解题过程：解析：引物在PCR以及DNA复制中的作用就是起到引导DNA聚合酶结合和开始聚合反应的过程。因为PCR中，DNA聚合酶不
ATCG.原理就是体外环境模仿人体内环境,完成人体内的DNA复制,大概就这样.
可以用,没有任何特别问题.实际上,如果你用过一些引物设计的软件,有时候你会发现,软件设计出来的引物长度有可能不同（当然,大部分时候是相同的）,这有可能是考虑的引物Tm,引物二聚体,引物非特异性结合等问
因为DNA聚合酶需要结合在双链区域,才能启动后续的脱氧核糖核苷酸的聚合作用.因此需要引物（PCR中是DNA,而生物体内是RNA）来构成双链区,从而使DNA聚合酶识别并结合,启动聚合作用.
选取目标片段长度在80-250bp的引物,在回头BLAST,特异性良好的话就可以了,一般我会多设计几个,选取最好的那个~
RNA在外界容易降解,所以在体外用DNA.这样比较容易操作.
因为RNA不稳定,非常容易降解.生活实验中随处可见RNA酶,比如你皮肤上、呼一口气里面,都可能有,可以降解RNA.而且DNA聚合酶它主要是要一个3‘的磷酸基团,所以DNA和RNA都一样.而且RNA掺入
Tm指的是把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度.我们PCR时候,当然不能用Tm值来作为退火的温度.一般来说,退火温度比Tm值要低上5度左右.但是这个也不是绝对的.建议你如果说模板比较充足的话,做一个梯
从原理角度分析,在Tm值的温度下,引物只能1半与模板DNA结合,低几度就全结合上去了.PCR扩增时需要引物完全结合到模板上才行.
博凌科为-为你上下游温度很接近啊,45度,上下5度,0.2每个梯度.或者直接用47度P