做RNA反转录时DTT的作用是什么

没有结合位点DNA就会消失吗?那段DNA只是目的基因而已.在构建基因表达载体的时候质粒中有目的基因,标记基因,启动子和终止子.如果这个目的基因DNA里没有转录成结合位点的基因(就是启动子啦),是需要添

反转录病毒有一个从RNA到DNA的逆转录过程,即病毒在反转录酶的作用下,以病毒RNA为模板,合成互补的负链DNA（与mRNA互补的DNA）后,形成RNA-DNA中间体.中间体的RNA被RNA酶水解,进

DNA啊!PCR是以脱氧核糖核苷酸为原料的而MRNA的组成是核糖核苷酸原料都不同而且PCR技术的原理是利用DNA双链的原理.以MRNA为原料会得到双链的RNA

RNA

用TAKARA的吧,相对便宜

就以慢病毒为例.包装好的病毒只含有结构质粒5'LTR和3'LTR之间的RNA序列.多质粒系统指的是慢病毒的包装系统,就三质粒（包装质粒、包膜蛋白质粒、转移质粒）包装系统来说,病毒包装必需的3个蛋白Ga

影响不大,不用考虑.TRIZOL等常用方法提出来的总RNA都有一些蛋白质污染.

反转录病毒能通过反转录酶的作用下,以病毒RNA为模板,合成互补的DNA后,进而在DNA聚合酶的作用下,由DNA复制成双链DNA.再问：-+RNA不是也可以么？再答：那你为什么不选b，那不是更正确，只有

DNA复制是以自身的两条链为模板,利用酶,游离的脱氧核苷酸,线粒体提供的能量,以碱基互补配对为原则,即G-C,A-T,进行半保留复制,复制出DNA.RNA制是以自身的一条链为模板,利用酶,游离的核糖核

DNA转录成了RNA啊.

第一次70度水浴5min为让RNA二级结构打开,便于引物结合.第一次冰浴1min为了退火,让引物能够结合RNA.37度水域是让cDNA聚合.第二次70℃水浴是再变性,让引物脱离模板RNA和cDNA第一

有些RNA病毒不反转录有些ssRNA病毒,一旦病毒颗粒中的RNA进入寄主细胞,就直接作为mRNA,翻译出所编码的蛋白质,其中包括衣壳蛋白和病毒的RNA聚合酶.然后在病毒RNA聚合酶的作用下复制病毒RN

逆转录酶有三种活性：RNA或DNA作模板的dNTP聚合活性和RNase活性.①DNA聚合酶活性；以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程.②RNaseH活性；由反转录酶催化合成的cDNA与模板R

DTT为常用还原剂,有抗氧化作用.它能保护酶分子上的还原性基团,维持还原性环境,稳定酶的活性.EDTA是一种生物实验常用的缓冲液,能保证裂解后体系不至于让大分子物质失活.

可以大概估算.考虑一下几个因素：1.大多数RNA是28s,16s,5s等rRNA,mRNA其实占少数.他们都会反转录为cDNA..你若估计mRNA反转为cDNA的量较难.2、反转录和你添加的引物量有关

小麦总RNA的提取实验目的从黄化小麦苗中提取总RNA,可以为cDNA文库的构建做好准备.我们重点是要保证RNA的完整性、产率、防止修饰和纯度,尤其是完整性、防止修饰和纯度.RNA是单链,2’OH是它的

操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水65C反应10min,冰上放置5min后：这一步是让RNA变性,把RNA的二级结构打开；再加dNTP,RNaseA,BUFFER,MTV逆转录酶,反应

DNA片段是插不到RNA去的.但是我们可以将目的基因的转录出mRNA插到反转录病毒的RNA里.让它们一起反转录生成含有目的基因的DNA.

这就是特异性不好,建议做如下改进：1,控制好RNA提取过程,尽量减少RNA降解和基因组DNA的混入；2,严重怀疑你的模板量过高,把模板稀释10-1000倍的梯度试试；3,做二阶段温度pcr,先用稍高退

DTT上的巯基可以保护逆转录所用酶的二硫键,增加蛋白稳定性.还是加吧~