25微升体系加了0.5微升引物-搜答案-百度作业网

点5ulMARKer（其实最好用超螺旋Marker）,1ul质粒（松弛型,如果是严谨性质粒浓度比较低要多点几ul）.电泳后比较条带亮度,如果和4kb条带一样亮则为100ng/ul,如果和其他条带一样亮

因为RT-PCR的模版是单链的RNA,一种引物就够了,而常规PCR的引物是双链DNA,需要上下游引物从两端同时扩增.

找一节塑料管子,用胶粘上行不?

会有残留要么是吸头质量不好,要么是密封性不好.

非变性胶就是很难看啊,好看就错了,不过可以尝试制胶的时候充分混匀,降低电泳电压.

解题思路：在PCR技术中双链DNA分子中每条链都要和引物结合，进行复制。解题过程：解析：引物在PCR以及DNA复制中的作用就是起到引导DNA聚合酶结合和开始聚合反应的过程。因为PCR中，DNA聚合酶不

随机引物PCR如果是RAPD的话,是要用单引物的一般是10bp大小的,CG含量要高于60%.

你取出1微升或2微升,用EB稀释100倍或50倍到100微升,OD260/280的比值在1.8-2.0是比较理想的,代表你的DNA纯度很高.波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/m

其实你原体系中7微升都太多了.我做50微升体系最多加3微升模板.菌液PCR只需要用枪头沾取菌落,或者加入2微升左右菌液即可.预变性时间可稍微延长.如果引物特异性好的话,和用DNA模板效果差不多.

不能,扩增酶扩增一定长度后会脱落,但你引物的互补链没有扩增,无法呈指数扩增,30个循环后只是扩增30倍根本没产物

稀释后的浓度=100μg/mL*(100*10^-6L)/(50*10^-3L)=0.2μg/mL

体系变化后会有些不同,但影响这么大,可能试剂没混匀,仪器孔加热不均一了,等等.如果25ul体系稳定,建议25ul就好.只是多P1管而已吧.

标准程序和对应的浓度是：引物合成公司——干粉——33μg/OD引物合成单上根据引物的分子量,会有一个建议的稀释体积,会将引物统一稀释到一个储液的浓度即——100μM通常我们做PCR时会将储液再进行10

PCR体系就是指一定比例的PCR要素（水、引物、酶、镁、dNTP、模板）的混合物.常用的体系有10微升、20微升、25微升、50微升等.通常小体系用于检测、分析,而大体系用于回收PCR产物.但是要注意

产生大量引物二聚体,一般pcr要求模板量不能过大,引物好像问题不是很大

10mM除20就是你PCR反应体系中的dNTP浓度了

20uM引物浓度指得是引物workingsolution的浓度.也就是说,当你从装有引物的管内,吸取一定量,加入到PCRmastermix配成反应混合液的时候,这个引物管内的浓度是20uM.如果1ul

10×扩增缓冲液2ul,4种dNTP混合物各200umol/L2ul,引物各10～100pmol0.5ul,模板DNA0.2ug,TaqDNA聚合酶0.2ul,Mg2+1.5mmol/L1.5ul,加

恩

拖带啊知道被合成基因的GC值吗?目的基因大小多少?这些都和PCR程序设计有很大的关系的如果你不知道只能进行梯度实验目测你的引物没有问题因为已经出来了dNTP少一点引物多一点