考马斯亮蓝法测蛋白含量壳聚糖有干扰

用标准加入法,必过原点.酸和水混合后,最好多静置一会,要不测出来的数值会不稳定.

应为不知道你的标准曲线Y的单位,如果是以加入的标准品的质量做出的曲线,同时没有什么稀释过程的话,你就直接算好了：Y=0.0044*68.790+0.0245=0.327176（单位）,总蛋白量=0.3

调零当然是用染色剂了,加和蛋白一样的水.商品化的和我们自己配的颜色都不一样,我们自己配的就是有点发青,用起来还是蛮不错的,和BCA的试剂盒差不多,蛮不错的.

你的蛋白质溶液太稀了,水浴加热,增加蛋白质浓度.我们那会就这样做的,不过注意加热时间,太浓还得稀释

标准曲线可以自己测定的.一般试剂盒上也有啊

你加入的试剂的量是否一样,比如考马斯亮蓝的体积之类的.再问：考马斯亮蓝的体积是一样的，其他试剂的体积严格按照表中用移液器加入的再答：个人觉得如果你的步骤完全正确，那么吸光度在0.097-0.229之间

Bradford法的突出优点是：（1）灵敏度高,据估计比Lowry法约高四倍,其最低蛋白质检测量可达1mg.这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大,蛋白质－染料复合物有更高的消光系数,因而光吸收

太浓了不好上样么.再问：是染色不好染么？上样是什么意思？再答：是先跑胶再染色么上样就是把样品加到胶孔里不知道你这是怎么测浓度对比标准品的亮度么如果浓度太大亮度没法区分开不就不好算浓度了

标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量一、标准曲线一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量.因此,制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术.二、蛋白质含量测定

该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精确的,但不适用于小分子碱性多肽的定量.如核糖核酸酶或溶菌酶.去污剂的浓度超过0．2％影响测定结果.如TritonX-100、SDS、NP-40等.1．Bradfor

会的.不仅碱性氨基酸,去垢剂,如SDS,还有高浓度的缓冲液都会有影响.而且由于蛋白质酸性,碱性氨基酸含量不同,即使蛋白质浓度相同,所测出的值也会不同.

大概与样品中的干扰物质有关.干扰Folin酚法的物质有：酚类、柠檬酸、硫酸铵、Tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等.干扰考马斯法的：主要是去污剂,如TritonX-100、十二烷基硫酸钠（SDS）和0

裂解液（10mL）：7mol/L尿素,4.2g；2mol/L硫脲,1.522g；4%CHAPS,0.4g；50mmol/LDTT,0.075g；0.5%CA(两性电解质),125微升；100mmPMS

考马斯亮蓝G-250（CoomassiebrilliantblueG-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种.考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为

1.分光光度计预热下会准些2.是否调0\100,3.用紫外的试试看楼主可曾换一台分光光度计试试,有些仪器时间长了不准的

先将以有机溶剂提取的待测样品作进一步纯化,充分除去有机溶剂；然后以水或氯化钠溶解,同标准曲线法测定样品液的OD值.

标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量一、标准曲线一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量.因此,制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术.二、蛋白质含量测定

当然不对,你可用BCA法定量

不是有个计算公式的么你先用标准溶液测定出标准曲线,然后计算就行再问：呃，我就是没明白他那个消光系数与我普通称个0.1mg牛血清白蛋白配置标液，蛋白浓度到底是多少。谢谢你的帮忙。再答：标准溶液蛋白浓度是

1.捣碎洋葱,但不能加去污剂,加去污剂会影响比色结果.过滤（假设你没有标准曲线）2.取一定量（这个其实可多可少,主要是每次分量一样就行）考马斯亮蓝G-250（别用成R-250!）,与已知浓度（浓度要小