pcr电泳maker弥散,产物拖尾

常温干燥、将残留乙醇挥发完,加入0.3mlddH2O溶解DNA；可以立即用于PCR分析或放置-20℃保存.注意!不同生物（植物、动物、微生物）的基因组DNA的提取

两者原因,可能是PCR体系没设计好,或者是胶没制好,跑电泳时注意保持电流恒定再问：多谢指教！跑电泳时我用的是恒功率，这个影响会很大吗？最近在做SSR标记有点迷茫！

可以照胶的时候去调节亮度,对比和γ射线,然后会清楚一些.同时,你优化下PCR扩增条件之类的,提高扩增效率.希望对你有帮助.望采纳.再问：感谢回答，我会试试调节亮度。请问，这跟电泳时使用的染色液有关系吗

说明扩增成功,目的条带大于100bp可以说明不是引物二聚体,但是扩增的量很少,可以增加引物量.阳性对照和阴性对照较为明显,所以虽然不亮的条带,但可以说明有东西PCR出来.内参很亮可能是引物设计的问题,

PCR产物纯化试剂盒去除的是PCR反应体系中的离子、dNTP、引物以及聚合酶,收集其中的DNA片段.这只适合于几乎没有非特异性条带的PCR产物的收集.如果你的PCR产物具有非特异性条带,那么一定需要使

问题很多啊.或者是你的PCR仪需要进行荧光校准（如果其他探针也没有信号的话）,已经不能收集荧光信号了.或者是你的探针本身就有问题,合成的不好,信号很弱甚至没有信号.或者是你的探针存放时间太长,存放条件

一个可能原因,DNA结合了蛋白质,所以跑不出去.加loadingbuffer后加热（90度以上）一下再上样试试.另外一个原因,你的产物特别大（不一定是目标产物）再问：我做的是菌落PCR电泳检测结果，我

博凌科为-为你不应该啊,要是没混匀,怎么可能目的条带出来了,你再跑一遍混匀试试看看就知道是不是混匀的问题了

actin如果都扩不出来那不是反转有问题就是RNA已经降解了.建议检查这两步的样品.建议检查程序,重新反转,如果还是扩不出来的话,重新抽RNA,再不行,回家过年吧.

首先要看你的条带是否清晰,虽然亮度不够但是清晰度应该高,没有拖尾没有非特异条带和引物二聚体,如果以上都没有,仅仅是目标条带不够亮的话,我觉得你可以将25微升体积同比放大至50微升反应体系,相应的制胶的

对PCR产物进行电泳是为了观察多态性条带的情况；目的片段大小的bp是指核酸序列的长度有多少个碱基对组成.

“从头拖到尾,另外一对引物就能做出来”说明不是引物之间形成二聚体,而是第一对引物的设计有问题（特异性很差）.如果一定要扩增那个区,建议引物的位置向两边放一放.如果你没有好的设计软件,建议到Primer

一般是不要切胶,直接把第一次的PCR产物取一微升作为底物,再用第二队引物扩增一次,如果引物设计正确,就只会出现一条条带了.如果要计算大小,就按楼上说的.但是雀式pcr的目的就是至少做2次,以保证特异性

出现非特异性扩增带PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带.非特异性条带的出现,其原因：一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体.二是Mg2

你提高退火温度再来一次吧,1000+bp的产物怎么会在250-500bp里,

非特异性扩增太多,建议稀释模板.提高退火温度,再试试.还有如果一次PCR产物也是如此,建议切胶回收与目的条带相近处的弥散带作为二次的模板.

退火温度较低导致的非特异性扩增是造成你遇到问题的原因.你可以通过TouchDownPCR或者梯度PCR摸索最佳退火温度后重新进行PCR.

开始我以为是退火温度问题,但是你说做了两次,第一次没有条带,第二次有一条没有,这说明你加样有问题,还有你为什么要同一个cDNA要做六个PCR呢?还是lz说的不清楚?同样的条件同样的样品没理由会六条中只

拖带啊知道被合成基因的GC值吗?目的基因大小多少?这些都和PCR程序设计有很大的关系的如果你不知道只能进行梯度实验目测你的引物没有问题因为已经出来了dNTP少一点引物多一点

首先怀疑,特异性不好,解决办法：1,可能是模板量过高,降低模板浓度10-1000倍；2,适当提高退火温度1-3度,或者先用高于你以往退火温度的1-3度先p上5个循环,再用先前温度p剩余的循环（也就是在