RT-PCR研究基因的时空表达模式

我也遇到过这种问题,个人觉得可能是目的基因的定量引物不好,还有就是要优化PCR条件!

聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术.它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点；能在一个试管内将所要

在做QRT-PCR时,一定要有内参,即在PCR时,每个标本都要做对应的内参,而且每次都是看家基因,一般用bate-actin,有时也用GAPDH.内参的选择：普通PCR内参的大小没有多大要求,但rea

看来是要研究的物种没有测序咯首先根据同源基因比对,然后在保守区域设计间并引物,先将保守区域克隆.然后根据保守区域设计基因特异引物,进行5’RACE及3’RACE,分别拿到保守区域两端的片断,然后序列拼

内参的选择：普通PCR内参的大小没有多大要求,但realtime一般选择300bp以下它的作用在于你提取的RNA逆转录成cDNA时,加入的浓度可能会不一致,即使用分光广度计测其浓度,也会有仪器误差.P

泛泛的说没有意义,因为基因不同引物设计难度和引物大小不同,以及之后的PCR难度都不相同,所以费用差别很大.建议直接询问可以代做试验的生物技术公司.再问：那大致有个范围么，求指教啊大侠！再答：找公司代做

你说的应该是realtimePCR吧,注意RT其实是逆转录reversetranscription的缩写,和realtime一定要分开来.常说的qPCR,qRT-PCR,都是通过实时（realtime

组蛋白基因(histonegene)组蛋白基因在各种生物体内重复的次数不一样,但都在中度重复的范围内.通常每种组蛋白的基因在同一种生物中拷贝数是相同的.鸡的基因组中组蛋白基因有10个拷贝,在哺乳动物中

提交不了答案.不要调一致把内参也检测了

转录水平初步检测,就用半定量RT-PCR；精确的定量要做Real-TimeRT-PCR蛋白水平做Western.最好两个多要做,因为转录水平高,不一定蛋白水平就一定高

现在你到了基因序列的网站,最下面的那一大段就是外显子2到9的序列.一般设计RT-PCR引物需要跨外显子交界,这样可以提高特异性.你可以先拷贝外显子2的序列（216..289）atggaggagccgc

为啥要把内参调一致呢你每次都也检测一下内参不就好了然后用目的基因的比上内参一般很少有什么调一致的吧.

做RT首先要知道第一步是提取细胞内的总RNA,然后将RNA加入反转录酶进行PCR.,反转录还是遵循碱基互补配对原则,以mRNA为母链合成子链cDNA,所以只能是单链结构,然后下一次循环时候则会以合成的

1,顺式作用元件的作用.比如,启动子,增强子,弱化子,终止子.2反式作用因子的作用.比如各类转录因子TFI,TFII,TFIII等.3.环境诱导的基因表达强度调控机制.比如lac操纵子在乳糖存在情况下

跟一般的PCR一样哇,PrimerPremier、Oligo都可以哦.

同位素示踪法特定元素标记看过程

那是显然的,所以在提rna做pcr的时候,如果里面混了基因组dna,那就有可能导致假阳性再问：谢谢，但是这不是我想要的答案。请问做半定量RT-PCR的引物怎么设计？可以设计在基因的非翻译区，然后扩非翻

由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”,由依赖RNA的DNA聚合酶（逆转录酶）来完成.随后,DNA的另一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖DNA的DNA聚合酶完成,随每个循环倍增,即通常

建议到UCSCgenomebrowser上看,那里每个基因的extron用大写字母表示,而Intron用小写字母.比较直观.设计引物建议用软件,比较好的免费网页有Primer3.至少要有一个引物是跨i

RT-PCR有2种.一种是REVERSE TRANSCRIPTION PCR.还有一种是REAL TIME-PCR如果你方便的话,我就直接贴英语的了.不做翻译了.RT-P