PCR产物的酶切问题我用的PCR-RFLP法分析SNP：我的PCR产物有条带,可是我做酶切之后还是那条PCR产物的条带做

来源：学生作业帮编辑：百度作业网作业帮分类：综合作业时间：2024/05/15 21:25:20

PCR产物的酶切问题
我用的PCR-RFLP法分析SNP：我的PCR产物有条带,可是我做酶切之后还是那条PCR产物的条带做了好几板都这样.病例和对照全做了,最后都没有切开的条带,这是怎么回事?十分感激.

PCR-RFLP技术我曾经做过,说实话这并不是一个稳定有效的鉴定方法,当时我也遇到和你一样的问题.
有这样的情况,一种是你选择酶的时候选择错误,在你该段基因上根本不存在这个酶切位点.
二是你根据别人发表序列确定了存在该酶切位点,但是因为基因突变等情况,导致你的病例酶切位点发生变化.
三是即使你病例存在了酶切位点,因为酶切体系的不合适,比如底物浓度过高,酶失活等,使得酶切失败.

PCR产物酶切的问题我做的是PCR-RFLP法分析SNP：引物是参照文献设计,takara合成的.订购的是takara的 PCR产物的酶切问题PCR产物进行taqI内切酶酶切鉴定结果出现了几条杂带分析原因可能为条带内切不完全导致昨晚酶切 PCR产物的电泳条带不够亮,为何?如何优化PCR反应体系 PCR产物酶切遇到的问题 PCR目的条带的问题, 在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带,请问这是为什么? PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常. PCR产物问题如图~第一张是taq酶跑出来的条带~有产物,大小780bp~marker是DL2000而第二次是高保真酶跑 PCR产物测序问题.我用简并引物扩增未知基因.设计了几对引物.都出现了目的条带.发现其中两对引物的产物长度比较长.因为我我构建的穿梭载体,连接好后进行双酶切和PCR两个途径的检测,结果酶切没有条带显示,而PCR确有目的条带! 胶回收：雀式pcr第一对pcr引物扩增后 ,产物电泳得到两条带,那么我该切哪一条啊? 植物中,SSR的PCR扩曾产物,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析时,怎么判断共显性条带?