WESTERN BLOT实验中转膜时滤纸和膜的大小有什么要求?是滤纸比膜小对吧?为什么?
来源:学生作业帮 编辑:百度作业网作业帮 分类:语文作业 时间:2024/05/06 03:21:12
WESTERN BLOT实验中转膜时滤纸和膜的大小有什么要求?是滤纸比膜小对吧?为什么?
还有封闭时除了用脱脂奶粉还有用其他的什么方法吗?
如何检测转膜是否彻底?
最后显色的方法都有哪些?根据什么来选择?
还有封闭时除了用脱脂奶粉还有用其他的什么方法吗?
如何检测转膜是否彻底?
最后显色的方法都有哪些?根据什么来选择?
你的问题好多啊
1 滤纸是上下都有的 之所以小一点儿 是怕上下的滤纸边缘直接短路,相连导致电子不能从胶穿过,这样不能达到很好的转移效率
2 可以用BSA,具体多大浓度,可以参照脱脂奶粉的
3 这个检测没多大用处吧 如果非要探讨这个问题 可以拿转完的胶再去染色(考马斯亮蓝或银染)
4 显色系统 基本就是HRP催化的DAB TMB等,AP催化的(NBTBCIP,我用的是roche的),也可以用HRP,AP催化化学发光,比如GE(原来的阿马西亚)的ECL(这个系统我没用过),赛默(原来的pierce)的化学荧光(我用过这个做southern)
1 滤纸是上下都有的 之所以小一点儿 是怕上下的滤纸边缘直接短路,相连导致电子不能从胶穿过,这样不能达到很好的转移效率
2 可以用BSA,具体多大浓度,可以参照脱脂奶粉的
3 这个检测没多大用处吧 如果非要探讨这个问题 可以拿转完的胶再去染色(考马斯亮蓝或银染)
4 显色系统 基本就是HRP催化的DAB TMB等,AP催化的(NBTBCIP,我用的是roche的),也可以用HRP,AP催化化学发光,比如GE(原来的阿马西亚)的ECL(这个系统我没用过),赛默(原来的pierce)的化学荧光(我用过这个做southern)
western blot,PVDF膜
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