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旋转蒸发仪浓缩75%乙醇水溶液,为什么无法彻底去除乙醇啊?

来源:学生作业帮 编辑:百度作业网作业帮 分类:化学作业 时间:2024/06/25 01:07:33
旋转蒸发仪浓缩75%乙醇水溶液,为什么无法彻底去除乙醇啊?
我用旋转蒸发仪浓缩细菌代谢物,使用的提取溶是75%乙醇水(PBS)溶液,提取体积大约是40毫升,令人纠结的是浓缩到2毫升左右时仍然无法完全去除里面的乙醇,这导致后续的冷冻干燥很麻烦,到底是什么原因啊?
旋转蒸发仪浓缩75%乙醇水溶液,为什么无法彻底去除乙醇啊?
乙醇和水会形成共沸物(参见物理化学教材二组分相图部分),用蒸发、蒸馏、甚至精馏等方法都无法将它们分离.你想用简单的办法尽可能除去共存的乙醇,有一个办法或许可行,但得做实验才知道.在浓缩到到比方5ml时,加入几毫升乙醚,继续浓缩,必要时再加入适量水和乙醚,继续浓缩,必要时重复上述过程(最后一次只加水不加乙醚),我估计可以除去绝大部分残留乙醇,不过会引入少量乙醚(不过它的量会比你原先的乙醇明显少).
用化学的方法难以分离,色层分离是一定可以的,但对你的问题似无必要.
再问: 不过现在我们怀疑主要用PBS缓冲液悬浮细胞,然后加入3倍体积的沸乙醇,然后在用旋转蒸发仪浓缩时导致最终的盐浓度过大,从而引发凝固点降低所致。你觉得呢?
再答: 跟这关系不很大,你想把它浓缩至干,或非常近干,你会发现旋转蒸发仪难以做到,这时沸点升高使其难以完全挥发才是主要原因。与凝固点降低没有关系,冷冻干燥时,难以凝固与凝固点降低有关。 有乙醇残留的原因仍是共沸。不用脱水剂,蒸馏、精馏法制备乙醇时,无法将水完全除去(残留5%)也是同样原因。
再问: 谢谢你,你的答案给我一定点启示,不过我们的样品在接下来是用来做核磁分析的,不知道乙醚对此是否有影响,谢谢。
再答: 做核磁前,你不分离吗?被测物(除乙醚外)是几乎是纯净物吗?其实你冷冻干燥时,乙醚也会基本跑光的,估计问题不大。
再问: 不用分,直接分析混合物啊。但问题是有机物无损害冷冻干燥器的。
再答: 乙醚对真空泵油有一定影响,但很小,可以直接冷冻干燥。不放心或老板比较苛刻(过分爱惜仪器,而不知时间的重要性)的话,你先用普通真空干燥器抽一会真空再冷冻干燥。