怎样摸索PCR条件我做的 RT-PCR 以内参为对照进行条件摸索 但是就是P出不来条带

我做的RT-PCR怎么样让内参一致?刚入门 老板让做内参的条件 反复做也没有要P出来的目的条带 我的退火温度是55 可以 半定量的RT-PCR预实验需要摸索哪些条件? 为什么我的RT-PCR内参跑不出来.目的条带到是跑出来了 请问,GAPDH作为RT-PCR内参的原理是什么呀?我知道为什用它做内参了,就是不清楚怎么用它, RT PCR只跑出内参的条带,没有目的基因,原因有哪些? 求荧光定量PCR高手原来好好的,突然坏了,找不到原因,求有经验的高手指教.用的是Taqman探针法,原先已摸索好条件,做 做RT-PCR时,上下引物退火温度一定要一样吗?内参条带很亮,为什么没有目的基因? PCR条件优化请问高手PCR产物目的条带以下有杂带,PCR条件该如何优化? 用RT-PCR检测目的基因的表达情况,需将内参基因的条带亮度调成一致. 用RT-PCR检测目的基因表达差异,需将内参基因的电泳条带亮度调成一致. 做ISSR 的PCR条件优化 进行质粒的细胞转染实验,摸索条件包括哪些呢?比如 温度.