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直接在NCBI里面查找金银花的内参基因,如果没有的话,就找与金银花同种属植物的内参基因.我做过猪的,在NCBI里查不到猪的内参基因,我就用的小鼠的,因为是持家基因,所以在哺乳动物里面表达的差异不大,也

在这个专利文件里面有全长,引物你自己设计吧

要在生物体或细胞内稳定表达的基因才能作为PCR的内参基因,因此又名看家基因,由于在不同细胞、组织中常量表达,没有组织特异性,因此不同昆虫之间可以共同使用内参.再问：那引物是根据自己的物种去具体设计还是

这个要看你在做PCR前的加样量是否一致.如果加样量是一致的,而内参做出来差别大（比如3-4个CT值）那说明你的实验体系有严重的问题.理论上加入的DNA量一样多,内参的CT值应该都一样.如果你能肯定加样

内参就是一个表达量在各个组基本保持不变的基因,又叫看家基因,比如常用的GAPDH,actin.或者18srRNA也可以.如果内参表达量一致,说明你PCR的上样量一致,样本的质量也一致.如果出入很大,说

可以鉴定出两种状态下细胞总RNA样品内A基因量的差异,但这个差异包含着误差：1,总RNA量的不准确性,虽然用分光光度计计算了浓度,但实际上还是有误差的存在,对那些表达水平只差那么丁点儿的样品尤其关键；

举例说吧,想用RT分析两种不同的细胞（高氧、低氧两种条件的培养物）中A基因的表达水平,RT可以鉴定出两种状态下细胞总RNA样品内A基因量的差异,但这个差异包含着误差：1,总RNA量的不准确性,虽然用分

这个就是SYBRGREEN的局限了.你要做内参话,必须在不同的管子里面另外在同时做.就像楼下说的那样.这样的话,不同管子见的加样误差就会干扰实验数据.内参的目的就是来对照加样误差的.实际上,真正的内参

RT-PCR就是将RNA先反转录为cDNA,在将转录得到的cDNA作为模板进行PCR反应扩增目标片段.用于反转录的引物根据实验的具体情况选择随机引物、OligodT及基因特异引物的一种.对于短的不具有

这个概念一般是用在定量PCR中.定量PCR是要检测某个基因的表达,降低或者提高,但是当你得出结果以后,你并不知道是它本身的表达降低/提高了,还是你操作过程中造成的误差（比如提RNA时的损失）,所以这个

好的内参基因应该受环境影响变化较小,否则不能作为对照与处理的内参.常用内参有actin,ubiquitin,histone等等,一般物种都有常用内参,不建议在这方面发挥.再问：看的文章里筛内参基因时怎

当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量大小相差比较明显情况下,可以在转膜后预染,根据蛋白质Marker的大小将膜剪为大分子量和小分子量两部分,使内参蛋白与目的蛋白分开.然后两块膜分别与内参蛋白抗

westernblot用来检测蛋白表达的变化,而检测表达变化的前提就是,你每个孔跑得总蛋白量是相同的,如果上样量都不同,还怎么检测不同组间目的蛋白量的区别,这样内参就可以作为检测蛋白上样量是否相同的标

actin如果都扩不出来那不是反转有问题就是RNA已经降解了.建议检查这两步的样品.建议检查程序,重新反转,如果还是扩不出来的话,重新抽RNA,再不行,回家过年吧.

[编辑本段]什么是新闻内参　　内参,顾名思义就是内部参考.广义的内参可指任何机构搜集的供内部人员参考的信息资料.在我国,新闻内参特指新闻媒体向各级党政机关专门呈送的一种新闻报道,是新闻的一种特殊形式.

1.protein-blot之前用Bradford测一下总蛋白量,估摸一下2.做完第一次后,用photoshop软件测一下各个内参条带的光密度值,这样可以给第二次调整的时候一个参考.

做定量PCR中用到的是一段表达量比较稳定的基因一般作为对照就是说您在做RT-PCR事为了去除不同标准本再RNA得产量,质量,以及逆转录效率上可能纯在的差别而获得目标基因特异性表达的真正差异,通常选择内

要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是WesternBlot.因为WesternBlot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化

一个一个查的：Oryzasativasspjaponicacv.Nipponbareactin：LOC_Os03g61970Oryzasativasspjaponicacv.Nipponbarealp

内参就是在cDNA里面的啊比如你有三种反转录的cDNA就分别用内参的引物做三组和目标基因一起做就行了不过是要单独加不是和目标基因的引物加在一个孔里