请问real time PCR实验为什么要使用内参基因?

来源：学生作业帮编辑：百度作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/05/08 11:07:20

举例说吧,想用RT分析两种不同的细胞（高氧、低氧两种条件的培养物）中A基因的表达水平,RT可以鉴定出两种状态下细胞总RNA样品内A基因量的差异,但这个差异包含着误差：
1,总RNA量的不准确性,虽然用分光光度计计算了浓度,但实际上还是有误差的存在,对那些表达水平只差那么丁点儿的样品尤其关键；
2,细胞整体表达水平会在不同情况下有差异,比如说高氧状态下细胞分裂速度更快,此时细胞内绝大多数基因表达水平都上调了,那此时A基因的增加就包括了整体水平的增加量和氧特异性诱导产生的增加量.
所以,我们需要找个能够表现细胞整体表达状态的基因作为参照,用来扣除第2种误差,同时,该参照也可以减少第1种误差对实验结果的误导.

请问real time PCR实验为什么要使用内参基因? real-time PCR中内参基因的CT值 Real time pcr目的基因Ct值相差1,内参差不多是怎么回事?做了2次都这样,不想是加样的问题定量PCR中,用内参基因进行标准化,为什么要用几何平均, 为什么要做real-time pcr 标准曲线 real time PCR看家基因的选择重要吗请问荧光定量PCR进行相对定量时,若是目的基因和内参基因扩增效率不一致,为什么会导致结果的不准确? 什么是real-time PCR 什么是real time PCR 我准备做定量PCR,需要检测的基因大约有10个左右,请问我需要多少个内参基因?只用1个内参行不行? 请问real-time PCR 一次分析多少个样本? 定量PCR数据分析中,标准化和归一化是怎样进行的用内参基因标准化时为什么要用几何平均