百度作业网rnai小鼠体内实验时,尾静脉注射siRNA后,怎样观察肝细胞和脾细胞摄取siRNA的比例?
来源：学生作业帮 编辑：百度作业网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/05/11 04:10:37
rnai小鼠体内实验时,尾静脉注射siRNA后,怎样观察肝细胞和脾细胞摄取siRNA的比例?
siRNA用荧光标记.注射后在规定时间去肝和脾,用流式细胞仪计数阳性细胞
再问： 我看别人用冰冻切片直接在荧光显微镜下看，是否可行？是不是更方便些？
再答： 切片无法看比例啊。切片如果要看定量，需要做3D立体计数。
再问： 看来还要熟悉流式的用法了， 还有个问题，体内实验直接注射裸siRNA效果会怎么样，我做的是胰腺炎相关实验，沉默TREM-1，我看文献上讲的，做体内实验时，是不是最好修饰一下或者构造载体等等
再答： 效率肯定很低。 几个问题，你如何定向？尾静脉注射，如果没有包裹外壳，肯定不能定向。那就设计为可以在特定细胞内表达的载体，选用特定启动子。
再问： 不需要定向胰腺组织，我是实验是针对重症胰腺炎导致的全身炎症反应，靶细胞应该是血液中的单核-巨噬细胞，看沉默靶基因后，对炎症反应是否有抑制作用，但裸siRNA在血液中应该很快就会被分解或排泄掉，能否进入细胞内，也是个问题， 我的前期试验就是注射裸siRNA来筛选有效序列，我觉得怕是有点悬，恐怕做不出结果！
再答： 这个效果和激素比较那个好？我个人觉得意义不大
再问： 我也郁闷，国内科研就这个鸟样
再问： 我看别人用冰冻切片直接在荧光显微镜下看，是否可行？是不是更方便些？
再答： 切片无法看比例啊。切片如果要看定量，需要做3D立体计数。
再问： 看来还要熟悉流式的用法了， 还有个问题，体内实验直接注射裸siRNA效果会怎么样，我做的是胰腺炎相关实验，沉默TREM-1，我看文献上讲的，做体内实验时，是不是最好修饰一下或者构造载体等等
再答： 效率肯定很低。 几个问题，你如何定向？尾静脉注射，如果没有包裹外壳，肯定不能定向。那就设计为可以在特定细胞内表达的载体，选用特定启动子。
再问： 不需要定向胰腺组织，我是实验是针对重症胰腺炎导致的全身炎症反应，靶细胞应该是血液中的单核-巨噬细胞，看沉默靶基因后，对炎症反应是否有抑制作用，但裸siRNA在血液中应该很快就会被分解或排泄掉，能否进入细胞内，也是个问题， 我的前期试验就是注射裸siRNA来筛选有效序列，我觉得怕是有点悬，恐怕做不出结果！
再答： 这个效果和激素比较那个好？我个人觉得意义不大
再问： 我也郁闷，国内科研就这个鸟样
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现在在做养细胞的实验,请问有人知道合成SiRNA-OCT4大概多少钱吗?
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miRNA和siRNA以及反义RNA的区别是什么?关键是求知反义RNA与miRNA和siRNA区别?
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英语翻译请不要复制!感激不尽~请人工翻译 定重谢！siRNA特征 在目前的RNAi模型中，第一步是Rnase-Ⅲ类的核酸
“siRNA导入到哺乳动物细胞中由此解决了在哺乳细胞内导入长的双链RNA时引发的干扰素效应”怎么理解?