high-performance size exclusion chromatograghy

来源：学生作业帮编辑：百度作业网作业帮分类：生物作业时间：2024/05/05 16:28:03

high-performance size exclusion chromatograghy
如题,请问这是什么层析?谢谢!
那请问这与分子筛层析(gel filtration chromatography)有什么区别呢?只是体现在分离时间上吗？

高效分子量排阻层析（HPSEC）又称高效凝胶过滤层析,它根据分子量大小来分离分子.凝胶基质由特定大小孔隙的球形小珠组成,不同分子量的分子从孔中排阻通过,发生分离.小分子进入孔内,会延滞它们通过层析柱,而大分子避开孔,洗脱入层析柱外水体积.因此,样品根据分子量大小进行分离,并依照分子量递减顺序洗脱.
依据层析目的和所需的分辨率来选择操作条件和介质.分子量排阻层析中一种常规的方法为基团分离,包括：
脱盐— 目标分子洗脱出来,而小分子保留在凝胶孔内.为了获得理想的分离,基质的分子量排阻限度应比目标分子小.
分级分离— 一定分子量范围的分子在凝胶基质内分离.使用这种方法时,目标分子应当在凝胶的分级分离范围以内.
高效分子量排阻层析常规应用包括蛋白分级分离及分子量确定、核酸分离、质粒纯化和多糖分级分离.
层析分辨率取决于颗粒大小、孔径大小、流速、层析柱尺寸和样品体积.通常,低流速（2–10 cm/hr）、细长柱、小颗粒凝胶、小样品体积（总床体积的1–5%）、2 倍的分子量差异以及相同的溶液粘度,可以获得最高分辨率. 如果用于脱盐,样品体积则可达到总床体积的30–40%,并可使用短粗柱.
与分子筛层析(gel filtration chromatography)相比,HPSEC在分辨率以及分离时间上都具有明显的优势.

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