退火温度与引物的TM值有什么联系?为什么退火温度要比TM低5度左右最合适?

退火温度与引物的TM值有什么联系?为什么退火温度要比TM低5度左右最合适? 为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? 为什么PCR所用退火温度要比引物实际Tm低那么几度? TAILPCR 反应体系中退火温度一般是多少 和特异引物的TM值有什么关系吗 引物的退火温度如何计算,用tm值减去5度,靠谱不?用1m na+的还是50mmna+? tm值与退火温度[求助]我想进行引物的特异性检验,进入primer-blast,怎么设置一些相关参数?我想进行引物的特异 我做引物特异性扩增,引物上的TM值是61.9度,我把退火温度从55度降到51度,隔一度试一次,二聚体还是有呢 在做RT-PCR时,或者是一般的PCR时,退火温度怎么设置,退火温度和Tm值之间有怎么样的关系? RT-PCR,自己前后引物Tm差7度,前引物63度,后引物58度,退火温度如何设置? PCR过程中引物的碱基数量与种类 和 退火温度有什么关系? 带酶切位点的引物设计时计算Tm值,退火温度及GC含量时是否要把酶切位点和保护碱基计算在内?我觉得不用,因为酶切位点可以不 ISSR-PCR引物的退火温度问题