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假如目的基因插入了质粒的四环素抗性基因中,筛选含目的基因的细胞,这个质粒还含有抗氨苄霉素基因.

来源:学生作业帮 编辑:百度作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/14 12:32:10
假如目的基因插入了质粒的四环素抗性基因中,筛选含目的基因的细胞,这个质粒还含有抗氨苄霉素基因.
等于说四环素的抗性基因被破坏了,抗氨苄霉素的基因还有.那么筛选含目的基因的细胞时培养基里放的是四环素还是氨苄霉素啊?看过不同版本的答案:1如果用的氨苄霉素,那只要是导入质粒的就能抗啊,不能检验这个细胞是不是含目的基因了.2如果用四环素,那目的基因的重组质粒,如果导入的细胞中不含抗四环素了,那么死亡的都是重组细胞,这样是分出来了,咱想要的都死了啊. 到底应该选用哪个素啊?不要告诉我其他方法了,这是一个题,就只能选这两个素,不需要其他方法.
假如目的基因插入了质粒的四环素抗性基因中,筛选含目的基因的细胞,这个质粒还含有抗氨苄霉素基因.
我看是要用氨苄霉素进行筛选.
楼主说的两点都对,所以因为第2点所说的原因,用四环素肯定会杀死你想要的细胞滴.至于第一点所担心的纯度问题,当然也是可能有某些细胞带有空质粒啦.这只能够靠前期插入(ligation)步骤的质量控制,尽量提纯质粒以后进行转染啦.但一般没有百分百这种事吧.要想在抗药性筛选以后进一步提纯细胞,貌似只能免疫染色以后去做流式分选啥的咯.