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真核过表达质粒,原核过表达质粒的区别~

来源:学生作业帮 编辑:百度作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/06/06 04:58:38
真核过表达质粒,原核过表达质粒的区别~
比如我需要过表达人恶性黑色素瘤细胞中的某蛋白,能在大肠杆菌中扩增后,转染到人恶性黑色素瘤细胞中,那么我需要的质粒是真核还是原核?
真核过表达质粒,原核过表达质粒的区别~
所有的质粒都是在细菌(原核)中构建和扩增的,但要在真核细胞中表达需要真核表达载体,要在原核细胞中表达需要原核表达载体.这两种载体主要的区别是启动子和polyA加尾信号的不同,一个适合在原核细胞中表达,一个适合在真核细胞中表达.
  你需要哪种质粒取决于你最终需要在哪种细胞中表达目的蛋白,如果你要直接在大肠杆菌中表达目的蛋白,然后用纯化的蛋白去处理黑色素瘤细胞,那你就应该用原核载体;如果你要在大肠杆菌中构建质粒,然后把质粒转染到哺乳细胞中表达目的蛋白,你就应该用真核载体.但无论哪种载体,构建和扩增质粒都是在大肠杆菌中进行的.
  至于抗性基因,因为所有质粒都要在大肠杆菌中扩增,所以都带有大肠杆菌的某种耐药基因.至于真核耐药基因则不一定,原核表达载体肯定不需要真核耐药基因,真核表达载体则有些有真核耐药基因,有些没有.另外,原核细胞的kana耐药基因和真核细胞的neo耐药基因是同一个基因.