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您好,提取口腔黏膜脱落细胞中DNA时用到的裂解液是什么成分?

来源:学生作业帮 编辑:百度作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/05/10 22:14:57
您好,提取口腔黏膜脱落细胞中DNA时用到的裂解液是什么成分?
您好,提取口腔黏膜脱落细胞中DNA时用到的裂解液是什么成分?
裂解细胞是为了获得其DNA,方法有很多种,超生裂解,碱裂解等等
细胞裂解液的主要目的:1.利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞;2.溶解蛋白;3.蛋白变性使其稳定;4.抑制蛋白酶活性
一般细胞裂解液的成分如下(用于提取DNA,如果要提取蛋白质,不建议使用SDS,而是用TritonX-100):
50mmol/L Tris-HCl (缓冲液,保证细胞裂解时PH值也能稳定.Tris是一种有机碱)
1.0 mmol/L EDTA (金属螯合剂)
150 mmol/L NaCl (电解质,用于协调细胞膜内外离子平衡)
0.1% SDS (十二烷基硫酸钠,是一种表面活性剂和还原剂.有增溶作用)
配制方法
取 1M Tris 溶液160ml用分析纯盐酸调至Ph=8.0(需浓盐酸约8.5ml),加双蒸H2O定容至200ml,高压灭菌备用.